pmOrange2 Vector from Clontech

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Cat No.SizePrice
Z2548N20 μg¥112,000
データ読み込み : 2011-08-26
 

仕様

※ 以下はバイオの買物.comがメーカーウェブサイトから自動抽出したスペックです。

  • Category : TOP > 製品情報 > 蛍光タンパク質・レポーターシステム > 蛍光タンパク質の色調/名称による分類 > フルーツ蛍光タンパク質レポーターベクター
  • Supplier Code : CLN
  • Supplier Cat. No. : 632548

※ 以下はバイオの買物.comがメーカーウェブサイトから自動要約した製品説明です。



  • 長波長域(553~649 nm)に蛍光波長をもつDsRed由来の新しい蛍光タンパク質
  • mCherryなど7種類の単量体蛍光タンパク質と非常に明るいタンデム2量体のtdTomato
  • DsRed抗体で認識可能
  • 柔軟な対応が可能なライセンスプログラム



Roger Tsien博士により開発され、これまでに数々の文献に紹介されてきたFruit Fluorescent ProteinsシリーズをClontech製品として販売している。(1~3)
mPlum、mStrawberry、mRaspberry、mCherry、mOrange、mOrange2、mBananaの7種類のフルーツ蛍光タンパク質は、mRFP1(単量体型のDsRedバリアント)に直接変異を導入して得られた単量体蛍光タンパク質である(4)。長波長域に蛍光波長を有し、融合タンパク質として数々の実績がある。

単量体 mCherry mCherryはヒトアクチン、チューブリン他いくつかの遺伝子と融合して発現することが確かめられており(図1)、mCherryやその融合タンパク質はArabidopsis(5)、ゼブラフィッシュ(6)、E. coli(7)、HIVビリオン(8)、およびイースト(9)での使用例が報告されている。蛍光共鳴エネルギー伝達(FRET)のような定量性の要求される実験にも使用例(10)がある。
また、FCMで測定を行い、異なるレベルでmCherryを安定発現するHEK 293細胞株を樹立したところ、mCherryを安定発現する細胞株は元のHEK 293細胞と同様の増殖能を示し、目視では細胞死などの影響は確認されなかった。


図1. mCherry融合タンパク質
mCherryをヒトアクチン(パネルA)またはチューブリン(パネルB)と融合し、哺乳類発現ベクターにクローニング後、HeLa細胞にリポソーム法を用いて導入した。細胞は形質転換36時間後に4%のパラホルムアルデヒドで固定し、Zeiss Axioskop顕微鏡、575/50、610、640/50 フィルターセットを用いて観察を行った。

mCherryならびにmOrange2のN末およびC末端融合タンパク質ベクター、大腸菌発現用ベクター(遺伝子供給用としても使用)を用意している。mCherryではプロモーターレスベクターも利用できる。これら以外の単量体フルーツ蛍光タンパク質は大腸菌発現用ベクターのみとなる。 tdTomato タンデム2量体ベクター

tdTomatoは2量体を形成するフルーツ蛍光タンパク質だが、凝集する傾向は見られず、2量体を形成することで他の蛍光タンパク質に比べて優れた蛍光強度を示す。励起と蛍光の極大波長は、それぞれ554 nm、581 nmです。tdTomatoタンパク質は分子内で2量体構造をとるため単量体のような物理的特性を示し、N-、C-末端融合タンパク質の作製にも適している。この構造の発色団を形成するのに必要な時間は37℃で1時間であった。
tdTomatoの示す波長特性と明るい蛍光は動物個体内での観察に理想的で、マウスへ移植した肺がん細胞の転移を調べた例では表皮から1 cmの深度まで蛍光が検出された。
tdTomatoには、N末およびC末端融合タンパク質ベクターのほか、大腸菌発現用ベクター、CMVプロモーターで構成発現するベクターを用意している。

表1. フルーツ蛍光タンパク質の特性

タンパク質 励起極大
波長(nm)
蛍光極大
波長(nm)
相対的な
蛍光強度
構造
mBanana 540 553 Fair
+
単量体
mOrange2 549 565 Bright
(photostable)
+++
単量体
mOrange 548 562 Extremely
Bright
++++
単量体
mStrawberry 574 596 Bright
++
単量体
mCherry 580 610 Bright
++
単量体
mRaspberry 598 625 Bright
++
単量体
mPlum 590 649 Bright
++
単量体
tdTomato 554 581 Extremely
Bright
++++
タンデム2量体
DsRed抗体での検出が可能

フルーツ蛍光タンパク質は、Living Colors DsRed Monoclonal Antibody(製品コード 632392、632393)またはDsRed Polyclonal Antibody(製品コード 632496)によるウェスタンブロット検出が可能である(図2、表2)。


図2. Western blotによる検出
mCherryを含む単量体の各フルーツ蛍光タンパク質を哺乳類での発現ベクター上にクローニング後 HeLa細胞に一過性に形質転換した。35,000細胞/1 Wellに細胞数を調整しWestern blotによる検出を行った。
パネルA:DsRed Monoclonal Antibody(1:500) パネルB:DsRed Polyclonal Antibody(1:1000)
レーン1:mPlum レーン2:mStrawberry レーン3:mRaspberry レーン4:mCherry レーン5:mOrange レーン6:mBanana レーン7:プラスミド未導入細胞 レーン8:DsRed-Express レーン9:AcGFP1


表2. ウェスタンブロットによるフルーツ蛍光タンパク質の検出

フルーツ蛍光タンパク質

製品コード

DsRed Monoclonal Antibody
(製品コード 632392、632393)
DsRed Polyclonal Antibody
(製品コード 632496)
mCherry 632522、632523
632524、632525
+++ +++
mRaspberry 632526 ++ +++
mPlum 632527 +++ +++
mBanana 632528 + +++
mOrange2 632548、632549
632550
(+) +++
mOrange 632529 (+) +++
mStrawberry 632530 ++ +++
tdTomato 632531 ++ ++
保存

-20℃

ベクター情報

632526:
Vector Information(PT3977-5)

632527:
Vector Information(PT3978-5)

632528:
Vector Information(PT3979-5)

 

蛍光タンパク質ベクター カテゴリーの中の製品: 284製品

主カテゴリー: Fluorescent Protein Vectors 
1 kit O36218 / Invitrogen ¥29,000
Organelle Lights™ Nuc-CFP
1 kit C10080 / Invitrogen ¥29,000
Organelle Lights™ Synaptophysin-GFP
1 ml C10582 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Actin-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10586 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Early Endosomes-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10587 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Early Endosomes-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10590 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ ER-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10591 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ ER-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10592 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Golgi-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10593 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Golgi-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10594 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Histone 2B-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10595 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Histone 2B-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10596 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Lysosomes-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10597 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Lysosomes-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10598 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ MAP4-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10599 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ MAP4-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10600 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Mitochondria-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10601 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Mitochondria-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10602 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Nucleus-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10603 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Nucleus-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10604 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Peroxisome-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10606 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Plasma Membrane-CFP *BacMam 2.0*
1 ml C10607 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Plasma Membrane-GFP *BacMam 2.0*
1 ml C10608 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Plasma Membrane-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10610 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Synaptophysin-RFP *BacMam 2.0*
1 ml C10611 / Invitrogen ¥29,600
CellLight™ Talin-GFP *BacMam 2.0*
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